由于特征性临床表现，肥厚型心肌病患者的诊断并不难。超声心动图检查对肥厚型心肌病的诊断有很大帮助，是一种非常重要的无创诊断工具。室间隔厚度大于或等于18cm，二尖瓣收缩期前移，足以区分梗阻和非梗阻患者。有些患者临床无症状，超声心动图检查后可提示肥厚型心肌病。左心导管检查和心室造影可证实诊断是否正确。
临床上，当你闻到胸骨下部左缘收缩期前的噪音，怀疑是梗阻性肥厚型心肌病时，可以通过改变左室流出道收缩期的压差来观察噪音的变化。
可采用具体方法：
含硝酸甘油，吸入亚硝酸异戊酯。滴入异丙肾上腺素，作为Valsalva运动时或使用洋地黄强心药后，心肌收缩力增强或静脉回流减少，左室出道梗阻加重，噪音增强。
使用血管收缩药物，如去甲肾上腺素；蹲、握拳时，应用β-受体阻滞剂，如普萘洛尔；心肌收缩减弱或周围阻力增强或静脉回流增加，左心室出道阻塞减少，听诊时噪音减弱或明显减弱。但近年来，随着心脏超声技术的不断进步，药物试验方法得到了很好的应用。
建立肥厚型心肌病，特别是梗阻型诊断，还需要鉴别诊断室间隔缺损、主动脉瓣狭窄、风湿性二尖瓣关闭不全、冠心病等疾病。
