1.新生儿筛查 新生儿期的PKU儿童无临床表现，出生后3个月才逐渐出现PKU的表现。随着预防医学科学的发展，苯丙酮尿症的新生儿筛查已逐步成为常规。新生儿筛查即是通过测定血苯丙氨酸，在群体中对每个新生儿进行筛检，使PKU儿童在临床症状出现前，早期诊断、早期治疗，避免智力落后。 2.尿三氯化铁(FeCl3)及2,4-二硝基苯肼试验(DNPH)
(1)三氯化铁(FeCl3)试验:新鲜尿液5ml加入0.5ml的FeCl3，绿尿呈阳性。
(2)2,4-二硝基苯肼试验：在1ml尿液中加入1ml的DNPH试剂，尿液呈黄色荧光反应呈阳性。
枫糖尿病和胱氨酸血症也可以看到这两种阳性反应，所以不是PKU需要进一步的血苯丙氨酸测定来诊断特异性试验。PKU由于苯丙氨酸代谢旁路不完善，患者尿液测定为阴性，不能用于新生儿筛查。
3.血苯丙氨酸测定 有两种方法：
(1)Guthrie细菌抑制：正常浓度：1200μmol/L。
(2)苯丙氨酸荧光定量法:正常值同细菌抑制法。
4.苯丙氨酸负荷试验 血苯丙氨酸浓度大于正常浓度，1200μmol/L诊断为PKU，600μmol/L在这种情况下，直接口服BH4片20mg/kg，BH4服前，服后2、4、6、824h分别取血作Phe测量Phe浓度
