1.新生儿筛查
大多数应用程序Guthrie细菌生长抑制法筛查本病，当血中亮氨酸浓度>4mg/dl(305μmol/L)尿中支链酮酸排出应进一步检测。
二、生化检测
临床儿童应进行电解质和血气分析。如果代谢性酸中毒和阴离子间隙扩大，应分析血液和尿液中的氨基酸和有机酸。一些儿童在急性期可能有低血糖。
三、分析氨基酸和有机酸
应用GC-MS可诊断儿童血液、尿液或脑脊液中氨基酸和有机酸的定量检测：
1.血中支链氨基酸和支链有机酸水平增加。
2.急性期，血液α-酮异戊酸浓度增加，尿液中α-羟异戊酸增加。
3.这种疾病在血液中可以检测到。L-别异亮氨酸(L-alloisoleucine)。
四、酶学检测
淋巴母细胞支链酮酸脱氢酶复合体的活力可以检测到培养的成纤维细胞。
五、DNA分析
可用于已知突变类型的家庭成员PCR扩增DNA用标记的寡核苷酸探针检测。
