小儿幽门螺杆菌感染应该做哪些检查?

       Hp诊断方法直接法和间接法两类。

       1.直接检查细菌 培养,PCR、直接检测胃粘膜的组织方法Hp。

       (1)培养方法:胃窦粘膜通过胃镜钳取出Hp培养是最准确的诊断方法,可以作为验证其他诊断试验的黄金标准。此外,还可以提供细菌药物敏感性试验,指导临床药物的选择,特别是治疗失败者或生活Hp耐药性高的国家和地区。Hp培养法具有特异性高、敏感性高、操作技术难、时间长等特点3~6天哪,即使是有经验的实验者操作,培养成功率也只有75%~95%。影响Hp造成假阴性结果的因素很多,如培养标本不含Hp;胃镜检查时吞咽表面麻醉剂;活检钳污染;或者最近使用的抗生素或铋可以抑制细菌的生长。此外,标本接种时间也与分离培养基是否新鲜有关。

       最近的报道也可以从人类粪便中培养出来Hp,但需要在微氧环境中离心,浓缩细菌,因为目前只能在50%Hp定植患者的粪便中检出,所以对此非侵袭方法尚需作进一步研究。

       (2)组织切片法:另一种Hp由于组织形态学的信息,直接检查方法可以提供Hp定居在人类胃粘液粘液下层,上皮细胞表面,正常情况下无其他细菌,因此可根据组织切片的形态特征和分布特征进行诊断 (胃粘液与胃腔之间有螺杆菌)Hp感染是一种更可靠的方法。组织学检查具有高度敏感性,可同时进行病理检查,并可永久保存数据。有许多染色方法,包括HE染色、Gram碳酸复红染色,W-S(Warthin-Starry)染色、Giemsa(吉姆萨)染色等。由于检出率低,几乎没有革兰染色;标准HE染色能检出Hp,但也不是可靠的方法,W-S银染是一项很好的技术。虽然价格和技术要求都很高,但由于检测有效,吉姆萨染色成本较低。一些作者认为这种方法在质量和W-S银染相等。

       除了常规织学检查外,还有免疫化学和免疫荧光方法,但需要使用免疫荧光镜和免疫抗体,使检查更昂贵,不能提供常规组织学发现以外的信息,因此不能常规使用,主要用于实验室研究。

       (3)直接涂片染色:用相差显微镜直接检查涂在玻片上的胃粘液Hp。可以用亚啶橙染色,革兰染色,Giemsa染色。

       (4)PCR(聚合酶联反应):PCR是检测Hp是否还有另一种方法可以快速检测新鲜胃粘液标本Hp,还可检测石蜡包埋活检样本。PCR所有的引物Hp菌株特异,因此具有高度特异性。与快速尿素酶、培养法和组织学相比,PCR它也很敏感。然而,一些隐藏的因素会影响这种高度的敏感性和特异性,如内镜和活检钳的清洁和消毒松懈DNA污染、降低特异性和降低敏感性的因素包括细菌在胃粘膜斑块中的定植或PCR存在抑制因素。PCR可用于Hp临床诊断感染,流行病学调查,Hp分子遗传学研究。

       2.细菌间接检查 利用细菌的生物特性,特别是Hp水解尿素的能力而产生呼气试验,尿素酶试验。血清学因不能提供细菌当前是否存在的依据,故不能用于目前感染的诊断,主要用于筛选或流行病学调查。对临床医师来说。根据医院的条件,选择合适的方法用于病人是重要的,目前主要采用联合方法诊断。

       (1)快速尿素酶试验:因为Hp它是人类胃中唯一能产生大量尿素酶的细菌,因此可以通过检测尿素酶来诊断Hp感染。尿素酶分解胃内尿素产生氨和二氧化碳,降低尿素浓度,增加氨浓度。基于这一原理,开发了多种检测方法。

       胃粘膜活检组织快速尿素酶试验是目前临床应用最广泛的方法之一,具有简单、实用、快速、敏感等优点。Hp当数量很少时,很容易出现假阴性;使用铋、氨萘西林,甚至H2尿素酶试验的敏感性在受体拮抗药物治疗后显著降低,因此该方法主要用于初步检测Hp感染。目前使用的方法有以下两种。

       ①pH指示剂:试剂含有尿素和尿素pH指示剂(如酚红pH 6.8时为黄棕色,pH 8.4时间是粉红色的)。从胃里取出的标本通常是酸性的(pH<6.0),一般来说,如果胃里有试剂,试剂的颜色是不变的Hp感染时,将粘膜标本放入试剂中,Hp尿素酶分解尿素产生氨,产生氨pH值升高,试剂变成粉红色。<6.0),一般情况下试剂的颜色不变,如果胃内有Hp感染,当黏膜标本放入试剂中,Hp所产生的尿素酶则分解尿素产生氨,使pH值升高,试剂变为粉红色。

       ②分析化学法:分析化学原理检测Hp尿素酶的最终产物不取决于试剂中的阳性显色反应pH改变可以避免一些影响pH因素造成的假阴性。福建三强生化有限公司生产CPUT试剂盒属于这种方法,可以半定量指示Hp感染程度( 、 、 、 )。

       (2)呼气试验:用核素标记尿素,口服后测定呼气中标记的CO2量,可间接反映尿素酶的量,属于非侵入性检查。呼气试验具有快速、可靠、安全、无疼痛的优点,适用于大规模流行病学调查,表明是否存在Hp感染,而不是曾经有过感染,所以比血清学检查好。研究发现,服用胶态枸杞酸铋剂2h后,即可见14CO2量明显降低,因此用于疗效观察是一种较敏感的指标,也是随访的一种理想方法。呼气试验根据标记物的不同,分为13C-尿素呼气试验(breath test)和14C-尿素呼气试验。

       (3)13C-尿素呼气试验:口服13C-尿素5mg/kg,随后每10min连续收集呼气标本,连续收集呼气标本3h。如果胃内有Hp感染,口服13C-尿素溶液在尿素酶的作用下分解成13CO2,胃肠道吸收后呼出。用质谱仪分析收集的气体标本,计算13CO2含量。有Hp口服试液后感染者20min即出现13CO2升高,在100min没有Hp感染者无13CO2呼出。13C无放射性稳定性核素,可反复检查。13CO2测量比较复杂,需要质谱仪,费用昂贵,大多数医院都无法进行。

       (4)14C-尿素呼气试验:克服13C-尿素呼气试验操作复杂,成本高。14C-尿素取代13C-尿素,同样令人满意的效果。14C可以使用液体闪烁计数器,所以更实用。缺点是缺点是。14C有一定的放射性,不适合孕妇和儿童。

       影响呼气试验精度的因素:假阴性结果最常见的原因是抗生素、铋或奥美拉唑的呼气试验(通常需要至少一个月);其次,尿素从胃排空过快或样本收集过晚。假阳性结果是体内或口腔中有尿素酶活性的细菌。

       但呼气试验只能提供Hp存在的信息,不能区分消化道疾病,不能代替胃镜检查,不能作为儿童上消化道症状的初步评价方法。

       (5)血清学检查:Hp血清学诊断是一种非侵袭性和间接性的方法,主要用于流行病学或筛查,不能简单地用作Hp除非与其他方法结合使用,否则最初的感染诊断工具。血清学检查的基础是Hp具有诱导身体局部和全身免疫反应的能力,用细菌凝聚、补体结合和ELISA能检测到三种方法Hp抗体,ELISA临床应用广泛,因为操作简单,诊断快,价格便宜,敏感性高。

       ELISA方法有2种:

       ①定性试验:阴性或阳性表示,不仅用于血清,还用于唾液、牙龈分泌物,特别适合儿童,缺点是假阳性率高,因此阳性结果往往需要补充另一种积极的方法。

       ②定量试验:由机器测试,结果更精确,还可用于治疗后的随访检查。

       血清学试验是一种理想的筛选试验,因为它是非侵入性的,简单地应用于儿童。Hp感染比成年人少。阳性发现比成年人更有利于诊断。儿童文献报道IgG抗体含量与细菌或胃炎组织学的严重程度有关。但血清学不能用作单一的诊断试验。Hp抗菌治疗后立即随访不能用于根除后抗体下降缓慢。

       血Hp免疫印迹法:Hp-IgG抗体、cagA、vacA蛋白质抗体可用于区分感染菌株的类型,但价格昂贵。

       Hp比较诊断检测方法(表1)。

       

 

小儿幽门螺杆菌感染应该做哪些检查?

       常规做胸片X线检查和B结核病、肝炎等慢性病除外。

           

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