发布于 2024-03-08 来源：复禾疾病百科
1.直接检查细菌
培训，PCR，直接检测胃粘膜的组织方法Hp。
1、培养法
胃窦粘膜通过胃镜钳取胃窦粘膜Hp培养是最准确的诊断方法，可作为验证其他诊断试验的黄金标准。此外，它还可以提供细菌药物敏感性试验，指导临床药物的选择，特别是治疗失败者或生活Hp耐药性高的国家和地区，Hp培养法具有特异性高、敏感性高、操作技术难、时间长等特点3～6天哪，即使是有经验的实验者操作，培养成功率也只有75％～95％，影响Hp生长，造成假阴性结果的因素有许多，如培养标本不含Hp；胃镜检查时吞咽表面麻醉剂；活检钳污染；或者最近使用的抗生素或铋可以抑制细菌的生长。此外，标本接种时间与分离培养基是否新鲜有关。
最近的报道也可以从人类粪便中培养出来Hp，但需要在微氧环境中离心，浓缩细菌，因为目前只能在50％Hp在定植患者的粪便中检测到，因此需要进一步研究这种非侵入性方法。
组织切片法
另一种Hp由于组织形态学的信息，直接检查方法可以提供Hp定居在人类胃粘液粘液下层，上皮细胞表面，正常情况下无其他细菌，可根据组织切片的形态特征和分布特征（胃粘液与胃腔之间存在螺杆菌）进行诊断Hp感染是一种可靠的方法。组织学检查的特点是敏感性高，可以同时进行病理检查，数据可以永久保存。染色方法有很多，包括HE染色，Gram碳酸复红染色，W-S（Warthin-Starry）染色，Giemsa(吉姆萨)染色、革兰染色，由于检出率低，几乎没有必要；标准HE染色能检出Hp，但也不是可靠的方法，W-S银染是一项很好的技术。虽然价格和技术要求都很高，但由于检测有效，吉姆萨染色成本较低。一些作者认为这种方法在质量和W-S银染相等。
除了常规织学检查外，还有免疫化学和免疫荧光方法，但需要使用免疫荧光镜和免疫抗体，使检查更昂贵，不能提供常规组织学发现以外的信息，因此不能常规使用，主要用于实验室研究。
3.直接涂层染色
用相差显微镜直接检查涂在玻片上的胃粘液Hp，可啶橙染色，革兰染色，Giemsa染色。
4、PCR(聚合酶联反应)
PCR是检测Hp是否还有另一种方法可以快速检测新鲜胃粘液标本Hp，还可检测石蜡包埋活检样本，PCR所有的引物Hp与快速尿素酶、培养法和组织学相比，菌株具有特异性，具有高度特异性，PCR它也具有很高的敏感性，但一些隐藏的因素会影响这种高度的敏感性和特异性，如内镜和活检钳清洗，消毒不严格DNA污染、降低特异性和降低敏感性的因素包括细菌在胃粘膜斑块中的定植或PCR抑制因素的存在，PCR可用于Hp临床诊断感染，流行病学调查，Hp分子遗传学研究。
二、间接检查细菌
利用细菌的生物特性，特别是Hp呼气试验、尿素酶试验和血清学不能用于目前感染的诊断，主要用于筛选或流行病学调查。对于临床医生来说，根据医院的情况选择合适的方法对患者很重要，目前主要采用联合方法进行诊断。
1、快速尿素酶试验
因Hp它是人类胃中唯一能产生大量尿素酶的细菌，因此可以通过检测尿素酶来诊断Hp基于这一原理，尿素酶分解胃内尿素产生氨和二氧化碳，降低尿素浓度，提高氨浓度。
胃粘膜活检组织快速尿素酶试验是目前临床应用最广泛的方法，具有简单、实用、快速、敏感等优点，但受细菌数量的影响Hp当数量很少时，很容易出现假阴性；使用铋、氨萘西林，甚至H2尿素酶试验的敏感性在受体拮抗药物治疗后显著降低，因此该方法主要用于初步检测Hp目前使用的感染方法有以下两种。
（1）pH指示剂：试剂含有尿素和尿素pH指示剂(如酚红pH6.8时为黄棕色，pH8.4时间是粉红色)，从胃里取出的标本通常是酸性的（pH〈6.0），一般来说，如果胃里有试剂，试剂的颜色是不变的Hp感染时，将粘膜标本放入试剂中，Hp尿素酶分解尿素产生氨，产生氨pH值升高，试剂变成粉红色。
(2)化学分析方法:化学原理分析检测Hp尿素酶的最终产物不取决于试剂中的阳性显色反应pH改变可以避免一些影响pH福建三强生化有限公司生产的假阴性因素CPUT试剂盒属于这种方法，可以半定量指示Hp感染程度。
2.呼气试验
用核素标记尿素，口服后测量呼气标记CO2量，可间接反映尿素酶的量，属于非侵入性检查，呼气试验具有快速、可靠、安全、无疼痛的优点，适合大规模流行病学调查，表明是否有Hp感染，而不是曾经有过感染，所以比血清学检查要好。研究发现，服用胶态枸杞酸铋剂2h后，即可见14CO2数量显著减少，因此疗效观察是一种敏感指标，也是随访的理想方法。呼气试验根据不同的标记分为13C-尿素呼气试验（breathtest）和14C-尿素呼气试验。
3、13C-尿素呼气试验
口服受试者13C-尿素5mg/kg，随后每10min连续收集呼气标本，连续收集呼气标本3h，如果胃内有Hp感染，口服13C-尿素溶液在尿素酶的作用下分解成13CO2，胃肠吸收后呼出，用质谱仪分析收集的气体标本，计算13CO2含量，有Hp口服试液后感染者20min即出现13CO2升高，在100min没有Hp感染者无13CO2呼出，13C稳定性核素，无放射性，可反复检查，但13CO2测量比较复杂，需要质谱仪，费用昂贵，大多数医院都无法进行。
4、14C-尿素呼气试验
克服13C-尿素呼气试验操作复杂，成本高。14C-尿素取代13C-尿素，同样令人满意的效果，检测14C使用液体闪烁计数器更实用，缺点是14C有一定的放射性，不适合孕妇和儿童。
影响呼气试验精度的因素：假阴性结果最常见的原因是抗生素、铋或奥美拉唑（治疗后至少一个月）；其次，尿素从胃排空过快或样本收集过晚，假阳性结果是体内或口腔中有尿素酶活性的细菌。
但呼气试验只能提供Hp存在的信息，不能区分消化道疾病，不能代替胃镜检查，不能作为儿童上消化道症状的初步评价方法。
5.血清学检查
Hp血清学诊断是一种非侵袭性和间接性的方法，主要用于流行病学或筛查，不能简单地用作Hp除非最初的感染诊断工具与其他方法结合使用，血清学检查的基础是Hp具有诱导身体局部和全身免疫反应的能力，用细菌凝聚，补体结合ELISA能检测到三种方法Hp抗体，ELISA临床应用广泛，因为操作简单，诊断快，价格便宜，敏感性高。
