肠道病毒所致各系统感染应该做哪些检查

       一、周围血象：

       大多数白细胞计数正常，感染某些肠道病毒时会增加，中性粒细胞也会增加。

       二、病毒分离：

       一般采用咽拭和粪便作为病毒分离和验证，也可从脑脊液、胸水、心包积液、血液、疱浆和活检或尸检组织分离到病毒，标本应立即检查，可接种于猴肾、胚胎肾、羊膜、双体或Hela细胞，KB在代际细胞中进行组织培养，观察细胞病变，用各种组织培养细胞分离，可以提高阳性率。阳性标本通过特殊免疫血清中和试验进行型别鉴定，怀疑柯萨奇A组病毒感染者应通过皮下、腹腔或大脑接种乳鼠进行病毒分离。由于其组织培养阳性率低，柯萨奇B乳鼠病毒也可以致病。

       三、血清免疫试验

       采用双血清测量特异抗体水平，一般可用于中和试验、补体结合试验、酶联免疫吸附试验（ELISA，酶标法)、放射性免疫等测定方法，其中中中和试验最可靠，中和抗体消失最慢，类型特异性强，如恢复期抗体水平早≥4倍增有很大的诊断意义，但由于肠道病毒种类繁多，血清学中和试验工作量大，只有在某个地方已知肠道病毒流行时才能理想诊断。

       四、免疫荧光快速诊断法

       用荧光染色免疫抗体识别抗原可以达到快速诊断的目的，但目前除脊髓灰质炎病毒感染外，肠道病毒感染不多，由于需要各种特殊的免疫血清，各种程序，最近使用了许多血清类型VP3-ZC抗原和多血清型VP1单克隆抗体与衣壳蛋白交叉反应改善了免疫诊断方法，但仍处于研究阶段。

       五、核酸杂交法

       由于不同血清型肠道病毒基因组间的同源性，特别是5′端非编码区部分区域高度保守，可供核酸杂交使近年来肠道病毒鉴定有了新的飞跃。探针有三种:

       1、cDNA探针：以病毒RNA某一片段为模板，由逆转录酶催化产生。大多数克隆在质粒载体中，然后将带有显色基因（生物素或地高辛）或同位素的核苷酸混合到新合成中cDNA在链中标记，如果标本先经12～24小时组织培训可以提高阳性率。

       2、RNA探针：由于RNA它是一个单链分子，因此它与靶序列的杂交反应非常有效，通常使用克隆肠道病毒的特殊转录载体RNA探针，混合几种RNA探针可以使病毒检测更广泛，RNA探针在特异性和敏感性方面优于探针cDNA探针。

       3.寡核苷酸探针:与上述两种探针相比，它们具有以下优点。由于链条短，与等量靶点完全杂交时间短，可以识别靶序列中碱基的变化，可以检测点突变，合成量大，价格低廉。5′端非编码区共同序列，可与大多数临床常见肠道病毒结合牢固而特殊。为了克服标本中肠道病毒滴度过低的问题，近年来被采用PCR法律将单一基因或短DNA序列放大，再与探针杂交，此法已应用于临床，在肠道病毒中枢神经系统感染流行时，从脑脊液中检测肠道病毒RNA，阳性率高，可在24小时内得到结果，平均需要病毒培养6～8天快多了，临床标本用PCR扩张后，肠道病毒探针杂交与非同位素标记，几个小时即有结果，对临床诊断有很大帮助。