疟疾应该做哪些检查？

       1.血液病原体检查 人体四种疟原虫只有一种恶性疟疾在周围血液中只看到环状体和配子体，在发作期间检测的机会更多，大多数原虫进入内脏毛细血管，如果配子体没有出现，血液检测可能暂时为阴性，因此恶性疟疾在发作期间最合适；其余三种疟疾血液检测不受时间限制，在发作期间和间歇期可见原虫。临床上，它类似于疟疾，阴性血液检测原虫，应坚持每天检查两次血液，连续几天。根据规定仔细检查厚血膜，其功率比薄血膜高很多倍，所有疟疾，最终都能在周围血液中找到疟原虫。血液涂片、染色和镜检仍然是最可靠的确诊疟疾的方法，如发现红内疟原虫。

       鉴于近年来受血液中原虫密度、生产染色技术、服药后原虫变形或密度下降、镜检经验等因素影响，对传统血液检测方法进行了一些改进。Becton Dickinson公司QBC法(quantitative buffy coat)。用含有抗凝剂和A啶橙的毛细管取出患者60μl血液，加一个浮子，离心后，疟原虫集中在红细胞和白细胞的下层。由于管道中心有浮子，将上述两层细胞和疟原虫推到管壁上，可以直接检查荧光显微镜下的疟原虫。该方法具有浓缩效果，可以提高敏感性，无需染色，节省时间。第二个是0.5％～1.0％皂素溶液取代普通水溶性血液，然后用吉氏液染色后镜检查。其优点是皂素处理的厚血膜底板清晰，无红细胞残骸和血小板干扰，有助于疟原虫检测。

       2.免疫学检测 ①疟原虫抗原检测；可发现原虫血症，可用于临床诊断为现有患者、人群传染源和评估疗效。主要方法有琼脂糖扩散试验、对流免疫电泳、酶联免疫吸附试验、直接荧光或酶免疫染色法等；②疟原虫抗体检测：可用于流行病学调查，可追溯感染源；通过确定流行地区抗体水平，推断疟疾的流行趋势；筛查供血，防止疟疾输血感染，评估抗疟措施的效果。此外，对于多次发作的原因，疟疾抗体的检测有助于诊断。常用的抗体检测方法有间接荧光抗体试验、间接凝血试验、酶联免疫吸附试验等。

       3.目前，国内外有几种不同的核酸探针用于疟原虫的检测。由于其独特的高特异性，其敏感性高于镜检，认为核酸探针技术很有可能取代传统的显微镜检查，可以在短时间内批量处理大量样本，被认为可以定量估计疟原虫血症水平，是疟疾流行病学调查和抗疟措施评价的潜在诊断工具。目前，大规模生产核酸探针和大规模现场使用仍有一些技术问题需要解决。

       4.PCR目前公认检测 ，在各种疟疾检测方法中，PCR该方法的敏感性和特异性最高。为进一步提高PCR在此基础上，巢式技术的敏感性和特异性，以及在实际工作中的便利性PCR(nested PCR)、PCR-ELISA研究其他方法。除抗凝血样中的疟原虫外，PCR疟原虫技术在滤纸干血滴上的检测也已成熟，便于检测PCR技术监测偏远地区疟疾。由于对实验技术和条件的要求较高，其在现场的应用受到限制。根据目前大多数疟疾地区的条件，现场采血后，应返回条件较好的实验室进行进一步分析和处理。

       5.Dipstick目前，世界卫生组织推荐应用Dipstick该方法的原理是利用恶性疟原虫合成和分泌稳定的水溶性抗原-富组蛋白Ⅱ(histidine rich proteinⅡ，HRPⅡ)，以其制备的单克隆抗体滴于免疫层析条上，经过吸附、洗涤与显色，检测血中富组蛋白Ⅱ存在。根据国外比较Dipstick报告其他几种方法，Dipstick该方法诊断疟疾的敏感性(84.2％～93.9％)和特异性(81.1％～99.5％)它们都很高；具有操作简单、快速、稳定、易学的特点。适用于难以保证镜检或实验室技术质量、需要确定疟疾流行范围、疟疾传播低、需要避免药物滥用以减少抗性发展的地区。必须指出的是，应用程序Dipstick该方法也有一定的局限性，很难检测到仍处于潜伏期或血液中只含有成熟配子体的恶性疟原虫。