一、实验室检查
1.肿瘤粘蛋白检测
可以提示肿瘤组织的来源，壶腹癌可以原发于十二指肠壁粘膜、胰管或胆管，但来源可能不同，Dauson和Connolly分析肿瘤产生的粘蛋白，提示肿瘤组织来源：唾液粘蛋白是胆管上皮和十二指肠粘膜的特征；中性粘蛋白是Bruner胰管主要产生硫酸粘蛋白。
2.组织病理学检查
肿瘤可以表现为息肉、渗透性和溃疡性。息肉状肿块质地柔软，花椰菜状较大。也可能来自腺瘤性息肉或绒毛状腺瘤的恶性变化。肿瘤边缘呈堤状隆起，硬度较大。当肿瘤呈渗透性生长时，可阻塞十二指肠腔，导致十二指肠腔狭窄和梗阻。镜检：十二指肠癌主要是腺癌，占81.4％，少数癌细胞产生大量粘液，形成粘液腺癌，偶尔可见分化不良的未分化癌。
3.粪便潜血试验
以溃疡病变为主，大便潜血为阳性。
二、影像学检查
1.气钡双重造影
行气钡双重造影可以提高诊断率，是首选的检查方法。由于癌症形态不同，X线形图像有不同的特点。一般来说，一些粘膜较厚、紊乱或皱纹消失、肠壁僵硬、息肉样充盈缺陷、神龛阴影、十二指肠腔狭窄、壶腹腺癌类似于溃疡引起的壶腹变形，容易误诊。
2、十二指肠纤维内镜检查
镜下见病变部位黏膜破溃，表面附有坏死组织，如见腺瘤顶部黏膜粗糙，糜烂，应考虑癌变，对可疑部位需取多块组织行病理检查，以免漏诊，因纤维内镜难窥视第3，4段，故可能遗漏诊断，临床可采用超长内镜或钡餐弥补其不足。
3、B超
超声内镜和CT检查：局部肠壁增厚，肿瘤浸润范围、深度、周围淋巴结转移、肝脏等腹部器官。
