乳酸性酸中毒的诊断主要在血液和尿液检测中，具体可见：
尿液和血酸度显著增加，血液pH＜7.0，CO2结合力下降至20容积％以下是血乳酸＞5mmol/L，有时可达35mmol/L（＞25mmol/L大多数人不治疗)，丙酮酸也相应增加到0.2～1.5mmol/L，乳酸/丙酮酸≥30/1，HCO3-降低，Na+，Cl-变化不大，Na+有时偏高，K+阴离子间隙常增高或正常〔Na++K+-（HCO3-十Cl-〕常＞18mmol/L，一般为25～45，但酮体增高不多，据此可确诊为乳酸性酸中毒。
大多数血白细胞在这种疾病中增加，有时可达6万/mm3，如果口服双胍患者有严重的酸中毒，酮体不明显增加，应怀疑该疾病，严重的休克酸中毒也应测量乳酸和诊断。
