1、实验室检查
强直性脊柱炎患者中强直性脊柱炎患者中HLA-B27基因阳性率为90％~95％，但人群中HLA-B27阳性者只有约10％因此，尽管患有强直性脊柱炎，HLA-B27强直性脊柱炎的检查具有很高的特异性和敏感性，但是HLA-B27检测结果既不能作为诊断依据，也不能预测患者的预后，只能增加诊断的可能性。
活动期患者可见血沉（ESR）增快，C反应蛋白（CRP）血小板增多，轻度贫血。类风湿因子（RF）阴性球蛋白和免疫球蛋白略有升高。
2、影像学检查
X线性表现对强直性脊柱炎有诊断意义。骶髂关节发生强直性脊柱炎最早的变化。X线条显示软骨下骨缘模糊、骨糜烂、关节间隙模糊、骨密度增加和关节融合。X骶髂关节炎病变程度分为5级：0级正常；Ⅰ级可疑；Ⅱ轻度骶髂关节炎；Ⅲ中度骶髂关节炎；Ⅳ关节融合强直等级。
临床可疑病例，X线片尚未显示清晰或清晰Ⅱ双侧骶髂关节炎改变者应采用计算机断层（CT）检查。该技术的优点还在于假阳性少。但是，由于骶髂关节解剖学的上部为韧带，因其附着引起影像学上的关节间隙不规则和增宽，给判断带来困难。另外，类似于关节间隙狭窄和糜烂的骶髂关节髂骨部分的软骨下老化是一自然现象，不应该视为异常。
磁共振成像技术（MRI）骶髂关节炎和脊柱炎的判断价值优于CT，只有MRI检查能够显示强直性脊柱炎骶髂关节炎0级病变，MRI其优点是通过观察强直性脊柱炎骶髂关节滑膜软骨和关节面下骨的形态和信号变化，达到早期发现和诊断强直性脊柱炎的目的。
3、超声肌肉骨骼
肌肉骨骼超声逐渐成为评价炎性关节炎的有力成像方法，在判断肌腱端炎、滑膜炎、滑囊炎及囊肿、骨软骨病变、脊柱关节炎活动、预后及治疗效果等方面具有独特的优势。
