一、血象 白细胞下降，血小板减少，完全贫血。
二、病原学检查 是诊断本病最可靠的方法，主要通过骨髓、淋巴结穿刺、涂片染色、显微镜检查LD小体。
1、穿刺检查
(1)涂片法 用骨髓穿刺物涂片、染色、镜检。这种方法最常用，原虫检出率为80％～90％。淋巴结穿刺应选取表浅、肿大者，检出率为46％～87％。淋巴结活检也可以进行。脾穿刺检出率高，可达90.6％～99.3％，但不安全，少用。
（2）培养法 接种上述穿刺物NNN放置22~培养基25℃温箱里。一周后，如果在培养物中发现活跃的前鞭毛体，则判定为阳性结果。在操作和培养过程中应严格注意无菌。
(3)动物接种法 穿刺物接种易感动物(如地鼠)BALB/c小鼠等)，1~2个月后取肝脾作印片或涂片，瑞氏染液染色，镜检。
2.皮肤活组织检查
在皮肤结节处用消毒针头刺破皮肤，取少许组织液，或用手术刀乱取少许组织作涂片，染色，镜检。
三、免疫诊断法
1.检测血清抗体 如酶联免疫吸附试验、间接凝血试验、对流免疫电泳、间接荧光试验、直接凝血试验等，阳性率高，假阳性率高。近年来，分子生物学获得了纯抗原，降低了假阳性率。
2、检测血清循环抗原 单克隆抗体抗原斑点试验用于诊断黑热病，阳性率高，敏感性好，特异性好，重复性好，只需要微量血清，也可用于疗效评价。
四、分子生物学方法
近年来，聚合酶链的反应及DNA探针技术检测黑热病效果好，敏感性高，特异性高，但操作复杂，目前尚未普遍推广。
