高危行为一次不一定会感染艾滋病，但存在感染风险。艾滋病主要通过性接触、血液传播和母婴传播三种途径感染，感染概率与病毒载量、黏膜破损程度等因素有关。
发生无保护性行为或共用针具等高危行为后，病毒需通过破损的黏膜或皮肤进入人体血液循环才可能引发感染。若接触者皮肤黏膜完整且病毒载量较低，感染概率相对较低。但若存在生殖器溃疡、肛门黏膜损伤等情况，病毒更易突破屏障导致感染。静脉吸毒共用针具时，病毒直接进入血液的感染概率较高。
部分极端情况下，单次高危行为也可能感染。如暴露于急性期艾滋病患者（病毒载量极高）的血液或精液，或接触者存在严重免疫缺陷、大面积黏膜损伤时，单次暴露风险显著增加。职业暴露中针刺伤感染的报告案例显示，即使单次接触也可能造成传播。
建议发生高危行为后72小时内尽快使用阻断药物，如富马酸替诺福韦二吡呋酯片、恩曲他滨替诺福韦片等组合方案，并及时进行HIV抗体检测。日常应正确使用安全套，避免共用注射器，伤口接触他人体液时立即消毒处理。高危人群可考虑采用暴露前预防用药，但须在医生指导下规范使用。
