一、粪便检查
革兰阳性芽孢杆菌可见于婴儿型和成人型的婴儿型肉毒中毒者。
二、细菌培养
加热可疑食物、呕吐物或排泄物，煮沸20min接种血琼脂培养基厌氧培养后，可分离肉毒梭菌。
三、毒素试验
1、动物试验：将检查样品浸出液体喂养动物或豚鼠，注射到小白鼠腹腔，会导致动物四肢瘫痪并迅速死亡，婴儿可以用婴儿粪便浸出液体动物试验。
2、中和试验：各种抗毒素血清0.5ml注射小白鼠腹腔内，随后接种标本0.5ml同时设置对照组，判断毒素和定型。
3、禽眼睑接种试验：浸出含有毒素的液体0.1～0.3ml，在家禽眼内角以下的眼睑皮下注入眼睑闭合，或麻痹性瘫痪和呼吸困难，几十分钟速诊断。
四、毒素检测
用抗肉毒杆菌毒素抗体进行中和试验，检查患者血清中的肉毒杆菌毒素，可分类毒素。
五、肌电图检查
肌纤维振动、单刺激反应减少、多刺激电势增加、短连续期小波幅多相运动、电势增加等表现，可作为辅助诊断。
